Mesquita, G.M.,¹ Garcia, R.A.V.G., ² Sartorato, A.¹

PALAVRAS CHAVE: Feijoeiro comum, Phaseolus vulgaris, mancha angular

O feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris L.) é uma das leguminosas cultivadas de maior importância no Brasil. A alta incidência de doenças nesta cultura tem sido considerada um dos maiores problemas responsáveis pelo seu baixo rendimento. Entre elas, a mancha angular, cujo agente causal é o fungo Phaeoisariopsis griseola (Sacc.) Ferr., pode ser encontrada em todas as regiões produtoras. Até o final da década de 80 era considerada uma doença pouco importante na cultura pois apresentava uma maior severidade apenas no final do seu ciclo. Hoje, sabe-se que é uma doença que pode causar até 70% de perdas da produção (Brenes, et al., 1983, Sartorato & Rava, 1992) sendo considerada uma das principais.Afeta toda a parte aérea da planta podendo causar a queda prematura das folhas e uma redução na qualidade do grão. O presente trabalho apresentou como objetivo demonstrar que no início de uma epidemia os conídios de Phaeoisariopsis griseola são provenientes de fora da área de cultivo.

O trabalho foi desenvolvido na área experimental, Fazenda Capivara, e laboratórios de Biotecnologia e Fitopatologia da Embrapa Arroz e Feijão, Santo Antônio de Goiás, GO.

O delineamento utilizado foi o de blocos completos casualizados, com três tratamentos (controle, cultivar resistente e cultivar susceptível), e quatro repetições. Como fonte de inóculo, foram utilizadas 3 plantas (plantas fonte), as quais foram transferidas para o centro de cada parcela (exceto na parcela controle) 44 dias após o plantio (DAP), ai permanecendo por sete dias consecutivos. As plantas fonte haviam sido inoculadas em casa de vegetação 15 DAP com uma suspensão do isolado Ig 746 contendo 2 x 10⁴ esporos.mL^-1 e antes de serem transferidas para o campo, sofreram um processo de adaptação às condições externas sendo deixadas em área com sombra natural por 3 dias. Ao final deste período, as plantas fontes foram transplantadas para o centro de cada parcela no final da tarde. Três folíolos apresentando sintomas de mancha angular foram coletados de cada parcela aos 57, 64 e 75 DAP, ou seja, 14 dias após o transplante das plantas fonte. A partir destes, foram realizados dois isolamentos monospórico, totalizando 24 isolados de cada tratamento. De cada tratamento foram utilizados apenas 12 isolados monospóricos perfazendo um total de 108 isolados em todo o experimento. Após o crescimento do micélio em meio BD (Batata-Dextrose) por aproximadamente 12 dias à temperatura ambiente, foram extraídos os DNAs utilizando-se o protocolo de Roeder & Broda (1987). Na amplificação dos DNAs pelo método do RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) foram utilizados os primers OPK 10, OPL 14, OPL 17, OPL 18, OPR 03 e OPR 13. Cada ciclo de amplificação constou de 94^oC por 15 segundos, 35 ^oC por 30 segundos e 72 ^oC por 60 segundos. Após 40 ciclos, foi realizado mais um passo de extenção de 72 ^oC por 7 minutos. Cada reação de 25 m L continha 25 ng de DNA, ),1 mM de dNTP, 2,0 mM de MgCl₂, 10 mM Tris-HCl, pH 8,3, 50 mM KCl, 0,4 m M de primer e uma unidade de Taq polimerase. Os produtos da amplificação foram corados com brometo de etídio. e visualizados em gel de agarose 1,5%.

Os resultados obtidos podem ser observados no dendrograma da Figura 1. O fungo P. griseola apresentou grande diversidade genética. A um limite arbitrário de 15% de distância genética relativa, a análise do experimento pode ser subdividida em 3 grupos. Os dois primeiros estão formados por apenas um isolado cada. O terceiro grupo apresenta um total de 106 isolados. Pode-se também observar que o subgrupo que contém o isolado utilizado como controle (Ig 746) apresentou seis outros isolados muito similares a ele, indicando que provavelmente estes isolados originaram-se do isolado Ig 746 ou que no campo experimental haviam alguns isolados muito similar ao isolado controle. O fato da mancha angular ser transmitida pela semente, é pouco relevante neste patosistema, uma vez que a percentagem de transmissão é da ordem de no máximo 2,5%. Os demais isolados, foram divididos em outros subgrupos, indicando uma falta de similaridade entre eles e aqueles que pertencem ao subgrupo do isolado controle. Este fato, indica que a grande maioria dos isolados atingiram as parcelas advindo de outro local que não as plantas fontes.

A maioria do isolados, de Phaeoisariopsis griseola encontrados na área experimental, difere geneticamente do isolado controle (Ig 746) sugerindo que uma epidemia é iniciada com esporos normalmente advindos de fora da lavoura/área experimental.